［摘要］　由于传统呼吸道病原体检测手段的限制，导致临床诊断难、治疗用药难。呼吸道感染多联检产品时效性高，可及早识别感染，并指导抗感染药物的合理使用。各种便携式（快速）诊断技术产品发展迅速，临床应用前景广阔。宏基因组二代测序技术（mNGS）对呼吸道感染病原体的检测覆盖面广、信息量大，对呼吸道病原体的早期发现，特别是新发传染病的病原体快速诊断，起到非常重要的作用。基于规律间隔成簇短回文重复序列（CRISPR）的核酸检测技术、三代测序技术及基因芯片技术等快速检测新技术为呼吸道病原体的诊断开辟了新的方向。]]> 2022/11/2 11:21:28 8true ［摘要］　耐药结核病是我国面临的重大公共卫生问题。分子诊断技术的不断发展促进了耐药结核病患者的早期诊断，但是不同耐药相关基因突变类型结果的解读成为分子耐药诊断领域的首要挑战。世界卫生组织于2021年出版了《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录及其临床应用指南》，旨在规范结核分枝杆菌分子耐药结果解读，特别是对于基于二代测序技术获得的结核分枝杆菌菌株获得的突变信息进行深入剖析，以期为临床提供更准确的耐药检测报告，也为耐药结核分子诊断技术在我国的推广使用奠定基础。]]> 2022/11/2 11:21:28 7true ［摘要］　抗生素过度使用加速了细菌耐药性的发生发展。当前，细菌耐药性已成为威胁全球公共卫生健康的重要因素之一。细菌耐药性检测技术包括以经典方法为主的肉汤稀释法、琼脂稀释法、纸片扩散法和浓度梯度法等。随后出现了一系列物理、化学方法和分子生物学检测技术，包括微流控图像检测、飞行时间质谱等。随着高通量测序技术的发展，各类细菌耐药基因数据库的开发和完善，全基因组测序、宏基因组测序和微生物单细胞转录组测序等新技术已逐步应用于细菌耐药性检测领域。该文将细菌耐药性检测方法分为传统经典方法、分子生物学技术和高通量测序技术三大类，阐述各类技术方法的原理、优点和局限性。回顾和反思当前细菌耐药性检测的技术和方法，对于规范抗生素的使用至关重要，也为临床超级耐药菌的预防和监测提供新的技术支持。]]> 2022/11/2 11:21:28 6true ［摘要］　聚合酶链反应是一种分子生物学技术，用于使某些脱氧核糖核酸（DNA）片段扩增，它是一种常见且不可或缺的技术，已应用于许多领域，特别是在临床实验室中。第三代聚合酶链反应，微滴式数字聚合酶链反应（ddPCR），是常规聚合酶链反应方法的生物技术改进，可用于直接定量和克隆扩增DNA。ddPCR现在广泛用于低丰度核酸检测，可用于感染性疾病的诊断。该文介绍了ddPCR检测手段的发展及原理，总结了其在病毒性疾病、细菌性疾病和真菌性疾病临床诊断中的潜在优势：ddPCR对低丰度病原体的检测更灵敏、准确、可重复，可能在未来临床应用中是比定量聚合酶链反应更好的选择。]]> 2022/11/2 11:21:28 5true ［摘要］　多重耐药菌已成为威胁全球人类健康的一项重大公共卫生问题。提高对多重耐药菌感染的识别能力与治疗效果仍是当前临床上应对多重耐药菌的关键措施。根据不同的耐药机制探索新的替代疗法（如噬菌体）有望在未来成为应对多重耐药菌的突破性技术。该文对多重耐药菌的流行病学、耐药机制和治疗以及新的替代治疗方法进行综述，为临床识别和治疗多重耐药菌提供重要参考。]]> 2022/11/2 11:21:28 4true ［摘要］　目的　分析涂片抗酸染色（涂片法）、结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）三种方法联合检测在结核病诊断中的应用价值。方法　回顾性分析2021年12月至2022年9月在广西壮族自治区人民医院同时进行涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF检测的临床疑诊结核分枝杆菌感染患者的检测结果，以临床确诊结果为“金标准”计算上述三种方法及其中两者联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率。分析三种检测方法单独和联合检测对结核病的诊断价值。结果　298例疑似结核患者中，排除31例，最终临床确诊为结核74例，非结核193例。涂片法、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度分别为43.2%、94.6%、63.5%，比较差异有统计学意义（χ²=44.861，P=0.000）；T-SPOT.TB检测特异度低于涂片法和GeneXpert MTB/RIF，差异有统计学意义（χ²=74.861，P=0.000； χ²=78.162，P=0.000）；三种方法检测准确率比较差异有统计学意义（χ²=23.468，P=0.000）。涂片法联合T-SPOT.TB检测的灵敏度与涂片法相比，差异有统计学意义(χ²=45.548，P=0.000)。涂片法联合GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度与涂片法相比，差异有统计学意义(χ²=6.965，P=0.008)。结论　在结核病诊断中，GeneXpert MTB/RIF和涂片法的准确率比T-SPOT.TB高，T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF的检测灵敏度显著高于涂片法。采用T-SPOT.TB或GeneXpert MTB/RIF联合涂片法均可显著提高结核病诊断的灵敏度，推荐采用联合检测方法以提高临床诊断效能。]]> 2022/11/2 11:21:28 3true ［摘要］　目的　探究肽核酸-荧光原位杂交（PNA-FISH）、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）快速鉴定白念珠菌的临床应用价值。方法　采用经VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪YST卡鉴定白念珠菌100株，模拟血培养阳性标本。对报阳的标本直接进行PNA-FISH鉴定，再转种培养出单个新鲜菌落，完成MALDI-TOF MS鉴定。记录两种方法鉴定白念珠菌结果和鉴定所需时间，计算其与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率。结果　100株白念珠菌模拟血培养样本，PNA-FISH鉴定结果与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率为98%，平均鉴定时间为（2.5±0.5）h。采用MALDI-TOF MS鉴定报阳后单个新鲜菌落，与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率达100%，从血培养报阳开始计算，平均鉴定时间为（22.0±0.6）h。结论　PNA-FISH方法鉴定白念珠菌，设备简单，鉴定结果可靠，相较于传统鉴定方法和MALDI-TOF MS方法，鉴定时间显著缩短，有较好的临床应用前景。]]> 2022/11/2 11:21:28 2true ［摘要］　目的　丝状真菌在质谱前处理方法上尚无规范化指南，寻求高效前处理方法为实验的关键，该研究以梅里埃质谱仪（VITEK MS）为平台，探讨适用于质谱仪鉴定曲霉的最佳前处理方法。方法　收集2021年1月至2021年12月由广东省人民医院临床分离并经基因测序的非重复曲霉114株，以及标准曲霉菌株3株，分别采用磁珠研磨法、冷冻研磨法和甲酸萃取法对117株曲霉前处理操作后进行质谱检测，比较不同前处理方法下的鉴定率、置信度、峰数量、耗时以及图谱质量的差异性。结果　117株曲霉分别采用磁珠研磨法、冷冻研磨法和甲酸萃取法进行前处理后获得的质谱鉴定率分别为90.60%、61.54%和57.26%。磁珠研磨法的鉴定率显著高于其他两种方法（P<0.001），鉴定能力最佳，且获得的置信度和峰数量亦高于其他两种方法（P<0.05），所获得的蛋白特征峰数量更多、强度更强、更密集，结果可信度和图谱质量优于其他两种方法。 结论　曲霉使用磁珠研磨法前处理后进行质谱鉴定可获得较理想的鉴定效果和蛋白图谱质量，适合常规实验室曲霉的质谱鉴定。]]> 2022/11/2 11:21:28 1true